| 아쉽게도 CD150에 대한 신뢰할 만한 염색법은 확립하지 못했습니다. 중요한 점은 tdTom + 세포가 3D 이미지에서 검출된 모든 c-kit + 세포 의 약 5%를 차지했으며 , 이는 FC로 측정한 tdTom hi 세포 의 비율과 유사하다는 것입니다 ( 그림 S4K –S4M). 이러한 결과는 가장 높은 tdTom 발현 수준(GFP + HSC 포함 )을 나타내는 세포만 현미경으로 효과적으로 포착되는 반면, 중간 또는 낮은 tdTom 신호를 나타내는 세포는 대부분 과소 대표된다는 것을 시사합니다. 생체 내에서 c-kit + 및 c-kit + tdTom + 세포 의 상대적 풍부도를 추가로 확인하기 위해 Cellpose-SAM을 사용하여 대용량 FL에 포함된 모든 핵을 정량화했습니다 .54 이러한 분석 결과는 FC 및 최근 이미징 연구에서 얻은 값과 일치했으며, 55 3D-QM의 정량적 신뢰성을 확인했습니다( 그림 S4N 및 S4O). 마지막으로, 우리는 기질성 중간엽 세포(CD45 − Ter119 − CD31 − CD140b + )와 큰 문맥 혈관을 둘러싸는 CD31 + EC 의 하위 집합 에서 Ctnnal1 -GFP의 발현을 관찰했지만 , 이들 세포는 tdTom 발현이 없었습니다( 그림 S5A –S5C). 따라서 Ctnnal 1 GFP Hlf tdTom FL에서는 HSC와 HPC를 시각화하고 다른 조혈 및 비조혈 GFP + 세포뿐만 아니라 배경 형광과도 높은 신뢰도로 효과적으로 구별할 수 있습니다. |
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